采用介質(zhì)研磨法制備BRE納米晶混懸液,以其粒徑和多分散系數(shù)(PDI)為評(píng)價(jià)指標(biāo),對(duì)研磨介質(zhì)的直徑和用量、研磨時(shí)間、穩(wěn)定劑種類和比例、BRE比例進(jìn)行考察,篩選工藝和;以BRE納米晶形態(tài)、色澤、粒徑和PDI為評(píng)價(jià)指標(biāo),對(duì)加不同種類凍干保護(hù)劑(5%甘露醇、5%葡萄糖、5%乳糖)和不加凍干保護(hù)劑進(jìn)行考察,篩選凍干保護(hù)劑;采用粒度分析儀、掃描電鏡、X-射線粉末衍射法(XRPD)、差示掃描量熱法(DSC)對(duì)以工藝和所制備的BRE納米晶進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。結(jié)果:BRE納米晶工藝及為
氧化鋯珠粒徑0.6mm、用量450g,研磨時(shí)間為1h,穩(wěn)定劑為15%吐溫80,BRE比例為25%,凍干保護(hù)劑。所制得的BRE納米晶為質(zhì)地疏松、色澤均勻的黃色粉末,平均粒徑為(283.10±3.08)nm,平均PDI為0.212±0.021,平均Zeta電位為(-38.48±0.39)mV;其為棒狀晶型,分布均一且晶型穩(wěn)定;20min內(nèi)累積溶出度為(90.37±1.22)%;在溫度(40±2)℃、相對(duì)濕度(75±5)%條件下,避光放置3個(gè)月后穩(wěn)定性良好。結(jié)論:BRE納米晶的制備方法簡(jiǎn)單、可行,且所制得的BRE納米晶穩(wěn)定性、溶出度均良好。
介質(zhì)研磨法制備過程簡(jiǎn)單、不需要加入溶劑、適用范圍廣,且所制備的納米藥物的粒徑窄[9]?;诖耍狙芯坎捎媒橘|(zhì)研磨法制備BRE納米晶混懸液,以BRE粒徑和多分散系數(shù)(PDI)為評(píng)價(jià)指標(biāo),篩選其工藝參數(shù)和;再經(jīng)冷凍干燥技術(shù)將其固化形成納米晶,并對(duì)其粒徑分布、形態(tài)、溶出度、穩(wěn)定性等進(jìn)行評(píng)價(jià),以期為BRE納米晶后續(xù)研究提供科學(xué)依據(jù)。
BRE納米晶混懸液工藝參數(shù)考察相關(guān),研磨介質(zhì)的粒徑、用量以及研磨時(shí)間對(duì)納米晶制備工藝有一定的影響[10],因此本研究選擇這幾個(gè)因素考察BRE納米晶混懸液的制備工藝。
2.1.1研磨珠粒徑的篩選稱取BRE原料藥7.5g,置于含有吐溫80(1.125g)的水溶液(22.5mL)中,攪拌混懸,再加入不同粒徑(0.6、0.8、1.0、2.0mm)的氧化鋯珠450g,研磨1h,分別制備3批BRE納米晶混懸液。以BRE納米晶混懸液的粒徑、PDI為指標(biāo),篩選研磨珠用量。結(jié)果,直徑為0.6mm的氧化鋯珠所制備的BRE納米晶混懸液的粒徑和PDI較小,因此確定研磨珠粒徑
為0.6mm。研磨珠粒徑的篩選結(jié)果見圖1。
2.1.2研磨珠用量的篩選稱取BRE原料藥7.5g,置于含有吐溫80(1.125g)的水溶液(22.5mL)中,攪拌混懸,再加入不同用量(390、420、450、480g)的氧化鋯珠(粒徑為0.6mm),研磨1h,分別制備3批BRE納米晶混懸液。以BRE納米晶混懸液的粒徑、PDI為指標(biāo),篩選研磨珠用量。結(jié)果,隨著氧化鋯珠用量的增加,BRE納米晶混懸液的粒徑、PDI逐漸減??;但氧化鋯珠用量增加到一定程度時(shí),BRE納米晶混懸液的粒徑、PDI反而增加,因此確定氧化鋯珠的用量為450g。研磨珠用量的篩選結(jié)果見圖2。
2.1.3研磨時(shí)間的篩選稱取BRE原料藥7.5g,置于含有吐溫80(1.125g)的水溶液(22.5mL)中,攪拌混懸,加入氧化鋯珠(粒徑為0.6mm)450g,分別研磨0.5、0.75、1.0、1.5h,制備3批BRE納米晶混懸液。以BRE納米晶混懸液的粒徑、PDI為指標(biāo),篩選研磨時(shí)間。結(jié)果,隨著研磨時(shí)間的延長(zhǎng),BRE納米晶混懸液的粒徑、PDI逐漸減??;研磨0.5、0.75、1.0h時(shí),BRE納米晶混懸液的粒徑、PDI減小的幅度較大;研磨1.5h時(shí),BRE納米晶混懸液粒徑雖然較研磨1.0h時(shí)的粒徑減小,但減小幅度不大。綜合考慮能耗和時(shí)間,確定研磨時(shí)間為1h。研磨時(shí)間的篩選結(jié)果見圖3。
BRE納米晶混懸液的考察
相關(guān),將難溶性藥物研磨成納米級(jí)的粒子后,能產(chǎn)生較高的表面能,進(jìn)而導(dǎo)致粒子的粒徑增加,失去納米晶藥物特有的物理、化學(xué)勢(shì)[11]。因此,常使用穩(wěn)定劑包裹在粒子的表面,粒子的聚集。常用的穩(wěn)定劑包括表面活性劑和高分子聚合物兩大類。本研究選擇非離子型表面活性劑泊洛沙姆、吐溫80和陰離子型表面活性劑SDS以及高分子聚合物PVPK30作為穩(wěn)定劑進(jìn)行篩選。
2.2.1穩(wěn)定劑種類和比例的篩選稱取BRE原料藥7.5g若干份,分別置于含有8%、12%、15%、18%不同穩(wěn)定劑(泊洛沙姆、吐溫80、SDS、PVPK30)的水溶液(22.5mL)中,攪拌混懸,加入氧化鋯珠(粒徑為0.6mm)450g,研磨1h,分別制備3批BRE納米晶混懸液。以BRE納米晶混懸液的粒徑、PDI為指標(biāo),篩選穩(wěn)定劑種類和比例。另外,為了充分比較穩(wěn)定劑種類和比例對(duì)BRE納米晶混懸液穩(wěn)定性的影響,筆者還考察了將其避光放置7d后的粒徑、PDI情況。結(jié)果,15%吐溫80和15%SDS作為穩(wěn)定劑所制得的BRE納米晶混懸液放置0、7d的粒徑變化不大,穩(wěn)定效果較好;由于SDS在研磨過程中會(huì)產(chǎn)生大量泡沫,影響藥物的回收,因此確定穩(wěn)定劑為15%吐溫80。穩(wěn)定劑種類和比例的篩選結(jié)果見圖4、圖5。
2.2.2BRE比例的篩選分別稱取BRE原料藥4.5、6、7.5、9g(在BRE納米晶混懸液中的比例分別為15%、20%、25%、30%),分別置于含有15%吐溫80的水溶液(水用量分別為25.5、24.0、22.5、21.0mL)中,攪拌混懸,加入氧化鋯珠(粒徑為0.6mm)450g,研磨1h,分別制備3批BRE納米晶混懸液。以BRE納米晶混懸液的粒徑、PDI為指標(biāo),篩選BRE比例。結(jié)果,隨BRE比例的增加,BRE納米晶混懸液的粒徑和PDI均先逐漸減少后逐漸;當(dāng)BRE比例為25%時(shí),BRE納米晶混懸液的粒徑和PDI小,因此確定BRE比例為25%。BRE比例的篩選結(jié)果見圖6。
2.2.3BRE納米晶混懸液的工藝驗(yàn)證取BRE原料藥7.5g(在BRE納米晶混懸液中的比例為25%),置于含有15%吐溫80的水溶液(22.5mL)中,攪拌混懸,加入氧化鋯珠(粒徑為0.6mm)450g,研磨1h,平行制備3批BRE納米晶混懸液,并測(cè)定其粒徑和PDI。結(jié)果,BRE納米晶混懸液的平均粒徑為(278.03±4.85)nm,平均PDI為0.192±0.012。